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通蔚生物帶您了解細胞換液的方式有哪些
更新時(shí)間:2023-11-27   點(diǎn)擊次數:602次

細胞換液是指去除舊的培養基,換成新的培養基以繼續提供細胞充足的營(yíng)養支持。當舊培養基 ph 值改變(含酚紅的培養基通常是變酸發(fā)黃)時(shí),需要及時(shí)進(jìn)行換液。在培養細胞的過(guò)程中,換液是一項非常常規操作,它主要是為了清除細胞在生長(cháng)過(guò)程中產(chǎn)生的各種代謝廢物,補充新鮮的培養基,促進(jìn)細胞生長(cháng)。細胞換液主要有全換液和半換液兩種方式,那么,不同方式的換液方法如何更換細胞培養瓶?jì)鹊娜芤耗兀?/p>


換液前工作準備

環(huán)境準備:相對密封、防塵、防菌的無(wú)菌室


操作者準備:雙手清潔呈可操作狀態(tài)

物品準備:超凈工作臺、CO2培養箱、裝有75%醫用消毒酒精的酒精噴壺、PBS緩沖液、含血清培養基、巴氏吸管、移液器、廢液缸。


工作準備:預熱培養基,酒精棉擦拭培養基瓶外表面后移入生物安全柜/超凈工作臺。

細胞培養箱中取出的細胞,酒精棉擦拭培養瓶/皿外表面,移入生物安全柜/超凈工作臺。可以稍等待,待生物安全柜中的循環(huán)風(fēng)將試劑瓶和培養瓶的外表面吹拂幾分鐘后,擰開(kāi)培養基瓶蓋虛掩,擰開(kāi)培養瓶瓶蓋虛掩,培養皿蓋不用擰。


第一種方式:細胞全換液

如果是貼壁細胞,可以用全量換液法,直接吸去全部舊培養基,補充足量新鮮培養基。


細胞


細胞全換液具體步驟

1.將器材放入超凈臺,打開(kāi)紫外照射滅菌,若是培養的細胞對溫度比較敏感,可以將含血清的培養基瓶放入37℃的水浴箱使得培養基溫度在37℃,再轉移到超凈臺紫外滅菌。另外,細胞培養間也需要紫外照射半小時(shí)左右。


2.從培養箱取出細胞培養瓶,用酒精噴壺在瓶子表面噴灑75%酒精消毒,轉移到超凈臺,打開(kāi)蓋子,輕輕吸出舊的培養液,可用移液器加入新鮮含血清培養基,注意一定不要從細胞貼壁面加入培養基,應從側壁加,動(dòng)作輕柔,以免沖落細胞。


3.加好培養基后,蓋上蓋子,在瓶子上做標記,注明換液時(shí)間,細胞種類(lèi),操作人員等信息。


4.放入培養箱之前應再次用酒精噴一噴瓶子表面,然后應記得整理操作臺,用酒精擦拭超凈臺臺面,清理廢液和垃圾。


第二種方式:細胞半換液

“細胞半換液"又稱(chēng)“細胞半量換液",即棄掉一半舊的培養基,再加一半新的進(jìn)去。選它的原因其實(shí)與前面不加PBS的理由有點(diǎn)相近。


半換液原因

1.給細胞提供適應的緩沖環(huán)境;

2.細胞生長(cháng)過(guò)程中可能會(huì )分泌某些生長(cháng)因子,促進(jìn)生長(cháng);

3.節省材料

4.方便操作:比如96孔板,換液很麻煩。所以常采用排槍進(jìn)行半換液;

5.對于懸浮細胞的培養,有時(shí)也會(huì )選用半換液減低細胞密度;


以上是通蔚生物帶您了解細胞換液的方式有哪些,希望可以幫助到大家。上海通蔚生物科技有限公司以質(zhì)量求生存,細胞以信譽(yù)求發(fā)展的精神,精益求精,力求做到更好,不管是過(guò)去還是現在和將來(lái),全體員工將再接再厲,以的服務(wù)態(tài)度,全新的精神面貌,為廣大新老客戶(hù),提供的產(chǎn)品和售后服務(wù),讓我們攜手共創(chuàng )美好未來(lái)!

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