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我們在收到細胞后首先應該對細胞進(jìn)行細胞活化︰

檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形，若有請立即通知。細胞株請盡速開(kāi)始培養，或立即冷凍保存(置于–70 °C，隔夜后，移到liq N2)。

然后需對凍細胞進(jìn)行解凍

1、依據細胞株數據單zhi定之基礎培養基種類(lèi)、血清種類(lèi)和其它zhi定之成份和比例，制備培養基。絕大多數之細胞均無(wú)法立即適應不同之基礎培養基或不同之血清種類(lèi)，若因實(shí)驗需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養基組成，確定細胞適應后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗。

2、FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清)，對細胞而言差異極大，請務(wù)必依據細胞株資料單zhi定之血清種類(lèi)培養之。

3、將培養基置于37 °C 水槽中回溫，回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之，移入無(wú)菌操作臺內。取出冷凍管，立即放入37 °C 水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化后，以70%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無(wú)菌操作臺。

4、依據細胞種類(lèi)和濃度，于無(wú)菌操作臺內取10 ml培養基加至T25 或T75 flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T25或T75 flask 內之培養基，混合均勻，放入37 °C，5 % CO2培養箱培養。

5、對絕大多數細胞而言，1 % 以下之冷凍保護劑DMSO，不會(huì )對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍.細胞中去除，待第二天確定細胞生長(cháng)或貼附良好后再去除即可。

極少數因對DMSO 敏感或會(huì )造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO 者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養基中，離心300 xg (約1000 rpm)，5 分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養基，將細胞均勻混合后，轉移至培養瓶中，再放入37 °C，5 % CO2 培養箱培養。